pct wss gdańsk

Homozygotyczne myszy R528Hm / m konsekwentnie wykazywały przejściowy wzrost siły mięśniowej o 10% 10 minut do infuzji (4 z 6 badań), które nigdy nie były obserwowane dla heterozygotycznych zwierząt R528H + / m (Figura 4D). Co ciekawe, nie było wykrywalnego wzrostu amplitudy CMAP związanej z tą większą siłą skręcania (Figura 4A). Zwiększona wrażliwość na fenotyp HypoPP u samców myszy R528H + / m obserwowana dla testów skurczów in vitro (Figura 3) i wyjściowa siła przyczepności (Figura 2) nie została wykryta przy prowokacji glukozą i insuliną (Figura 4). Pobudliwość mięśni u myszy R528H. Przejściowa utrata siły podczas ataku HypoPP u ludzi jest spowodowana przez depolaryzację potencjału spoczynkowego, który paradoksalnie występuje w warunkach hipokaliemii (3) i dezaktywuje kanały sodowe, aby uczynić włókno nieodporne. Mierzyliśmy Vrest z impulsu mikroelektrodowego poszczególnych włókien w mięśniu płaszczkowatym utrzymywanym w temperaturze 37 ° C in vitro. W 4,75 mM K +, Vrest był porównywalny dla WT i heterozygotycznych R528H + / m włókien, ale był depolaryzowany przez 15 mV (P <0,001) dla homozygotycznego R528Hm / m mięśni (Figura 5A). Co ważniejsze, w odpowiedzi na hipokemiczną prowokację 2 mM K +, włókna WT hiperpolaryzowały zgodnie z oczekiwaniami z negatywnego przesunięcia potencjału Nernsta dla K +, podczas gdy włókna R528H paradoksalnie depolaryzowały (Figura 5A). Wewnętrzna pobudliwość włókien została stwierdzona przez wstrzyknięcie prądu trzymającego, aby ustawić Vrest na ~ 85 mV, a następnie wywoływanie potencjałów czynnościowych przez zastosowanie 2-ms impulsów prądu o różnej intensywności. Prąd trzymania kompensował różnice w Vrest, które w przeciwnym razie miałyby silny wpływ na dostępność kanałów sodowych. Nie zaobserwowano różnic w potencjale czynnościowym amplitudy, progu, maksymalnej szybkości wzrostu lub czasu trwania pomiędzy WT i R528H + / m lub R528Hm / m włókien (Figura 5B). Przeciwnie, nasz model myszy HypoPP z mutacją NaV1.4 R669H miał zmniejszoną amplitudę igły, wolniejsze tempo wzrostu i przedłużony czas trwania, zgodny z redukcją dostępności kanału sodowego (22). Rycina 5 Zredukowana pobudliwość włókien R528H jest spowodowana przez depolaryzację Vrest. (A) Potencjał spoczynkowy w 4,75 mM K + był porównywalny dla WT (. 71,1. 0,68 mV, n = 509) i R528H + / m (<69,2. 1,0 mV, n = 166) mięśnie płaszczkowate, ale depolaryzowane w mięśniu R528Hm / m ( 5 54,8-0,75 mV, n = 216). Wymiana kąpieli na 2 mM K + dla tych samych próbek mięśni spowodowała hiperpolaryzację (. 7,0. 1,0 mV) dla włókien WT, podczas gdy włókna R538H depolaryzowały o 2,4. 1,4 mV (R528H + / m) i 5,9. 0,98 mV (R528Hm / m). (B) Zastosowano prąd trzymania, aby ustawić Vrest przy ~ 85 mV w zdysocjowanych pojedynczych włóknach, a potencjały czynnościowe zostały wywołane przez zastosowanie 2-ms impulsów prądu o wzrastającej intensywności. W tych warunkach próg, amplituda, szybkość narastania i czas działania potencjałów czynnościowych były identyczne dla włókien WT, R528H + / m i R528Hm / m. Nieprawidłowy prąd wewnętrzny w włóknach R528H. Choć od dziesięcioleci wiadomo, że depolaryzowane przesunięcie Vrestu powoduje utratę pobudliwości podczas przyłączania HypoPP (3), tożsamość prądu (ów), które powodują tę zmianę, była nieuchwytna. Paradoksalnej depolaryzacji w niskim K + nie zapobiegają leki, które blokują pory przewodzące jony zmutowanych kanałów (tetrodotoksyna dla NaV1,4 HypoPP lub nitrendypina dla CaV1.1 HypoPP) (24, 25). Zadziwiające skupienie mutacji HypoPP na resztach argininy w czujnikach napięciowych S4 NaV1.4 lub CaV1.1 implikuje wspólny mechanizm, w którym te mutacje S4 wytwarzają zależny od napięcia prąd porowy lub bramkowy (16, 17). Rzeczywiście, zadowalające prądy porowe zostały zademonstrowane dla wszystkich mutacji 6 NaV1.4 HypoPP testowanych w oocytach (21) i włóknach mięśniowych z naszej myszy knockin NaV1.4 R669H HypoPP (22) [przypisy: omega kleszczów, operacja kręgosłupa szyjnego, opiekun osoby starszej ]