szpital wojewódzki siedlce ortopedia

Zgodnie z oczekiwaniami szczytowych wartości prądu wewnętrznego, maksymalna przewodność, Gmax, została zmniejszona w R528Hm / m włókien (146. 9 nS / nF, n = 20) w porównaniu z włóknami WT (309. 14 nS / nF, n = 23) , podczas gdy tylko niewielka redukcja wystąpiła w R528H + / m włókien (280. 12 nS / nF, n = 23). Aby lepiej porównać zależność napięcia dla aktywacji kanałów CaV1.1, gęstość prądu została podzielona przez Gmax (V. Erev), aby obliczyć względną przewodność (Figura 7B). Skromna różnica w połowie aktywacji (V1 / 2), odzwierciedlona przesunięciem wzdłuż osi napięcia, nie była znacząca (ANOVA z korekcją Bonferroniego). Zależność napięciowa była jednak bardziej stroma dla włókien WT (P <0,001), co odzwierciedla mniejsza wartość K (WT: 4,4. 0,19 mV, n = 23; R528H + / m: 5,3. 0,10 mV; R528Hm / m: 5,3. 0,2 mV, n = 20). Przebieg czasowy aktywacji był około 2-krotnie wolniejszy dla R528Hm / m (stała czasowa 14,7. 0,67 ms dla R528Hm / mw porównaniu z 6,8. 0,62 ms dla WT; P <0,0001), jak pokazano przez superpozycję prądów znormalizowanych amplitudowo wzbudzony przy 0 mV (Figura 7C). Ryc. 7 Zmiany utraty funkcji dla prądu jonowego prowadzone przez kanały CaV1.1 R528H. (A) Szczytowa zależność prąd-napięcie zmierzona w zdysocjowanych włóknach FBD z 2 mM Ba2 + jako nośnikiem ładunku wykazała 53% zmniejszenie gęstości prądu dla włókien R528Hm / m. (B) Transformacja prądu szczytowego do przewodnictwa względnego wykazała, że zależność napięcia aktywacji była porównywalna dla kanałów WT i R528H. (C) Prądy Ba2 + wywołane przez depolaryzację od> 100 mV do 0 mV były amplitudą znormalizowaną do szczytowego prądu wewnętrznego, aby zilustrować szybkość aktywacji była wolniejsza o 50% dla kanałów R528Hm / m. Względne spowolnienie szybkości aktywacji we włóknach R528Hm / m obserwowano w całym zakresie potencjałów testowych od <30 mV do 20 mV. Szybkim przejściowym przejściem był prąd przesunięcia ładunku z przemieszczenia czujników napięciowych. (D) Zależność napięcia dla przesunięcia na zewnątrz ładunku czujnika napięcia z depolaryzacją membrany (Qon). Maksymalne przemieszczenie ładunku zostało zmniejszone o 36% we włóknach R528Hm / m. Redukcja ładunku dla R528H była mniejsza niż redukcja gęstości prądu jonowego, co sugeruje, że mutacja zakłóca sprzężenie ruchu czujnika napięcia z otwarciem kanału. Poziom ekspresji CaV1.1 na membranie oszacowano przez pomiar przejściowego małego prądu związanego z ruchem czujników napięcia kanału. To tak zwane przemieszczenie ładunku bramkowania mierzono w kąpieli zawierającej Co2 + (1 mM) i La3 + (0,1 mM) w celu zablokowania prądów jonowych prowadzonych przez CaV1.1. Zależność napięciową przesunięcia ładunku bramkowego pokazano na fig. 7D. Przesunięcie ładunku nasyca się przy zdepolaryzowanych potencjałach, gdzie wszystkie dostępne czujniki napięciowe przesunęły się do konformacji stanu aktywnego. Całkowite przesunięcie ładunku zostało zmniejszone we włóknach R528H (R528Hm / m: 21,4. 1,5 pC / nF, n = 19, P <0,001; R528H + / m: 28,2. 1,5 pF / nC, n = 23, P <0,02; WT: 32,6 -1,2 pF / nC, n = 34), zgodne ze zmniejszoną ekspresją błony w porównaniu z WT. Względne zmniejszenie szczytowego prądu jonowego dla włókien R528Hm / m (53%, Figura 7A) było znacznie większe niż względny spadek przemieszczenia ładunku (36%, Figura 7D). Ta rozbieżność oznacza, że obniżonej gęstości prądu jonowego nie można w pełni wyjaśnić przez niższy poziom ekspresji R528Hm / m na membranie. Jedną z możliwości jest mutacja R528H częściowo oddziela ruch czujnika napięcia do otworu porów CaV1.1. Wzbudzenie wzbudzenia u myszy R528H jest zakłócone. Translokacja czujników napięciowych w CaV1.1 jest sprzężona z otwarciem kanału wapniowego uwalniania retikulum sarkoplazmatycznego (SR) lub receptora ryanodinowego RYR1 (26, 27) [podobne: olx maków maz, oct oka, objawy sm ]